IMLINFO adquiere CYTATION 1 para el estudio de organoides de Linfoma no Hodgkin (LNH) en 3 dimensiones

El pasado mes de noviembre de 2018 IDIBAPS, coordinador del consorcio IMLINFO EFA281/16, adquirió el equipo de microscopia avanzada Cytation 1 (Biotek).

La adquisición del mismo ahora permite al grupo de la Dra. Patricia Pérez Galán realizar el análisis de los modelos en 3 dimensiones (3D) de linfoma (organoides) generados en el marco del proyecto IMLINFO de modo cuantitativo, preciso y automatizado.

El Cytation 1 es un microscopio automático con 4 canales de fluorescencia que permite analizar la distribución espacial de las distintas poblaciones  de células que integran el organoide, así como el efecto de terapias antitumorales en 3D, gracias al software asociado Gen5.

Este software cuantifica de manera automática las dimensiones y compactación de cada esferoide, así como la fluorescencia media en cada canal, permitiendo cuantificar por ejemplo la viabilidad o muerte celular en poblaciones especificas, la proliferación celular, la hipoxia, entre otros parámetros. Además, gracias a su módulo de control de gases y temperatura, Cytation 1 permite realizar cinéticas de evolución de formación del organoide, redistribución de poblaciones o efecto de fármacos.

El análisis en Cytation 1 se realiza en paralelo a la citometría de flujo para completar los estudios de fenotipado en las poblaciones B, T  y de células acompañantes del microambiente tumoral

Para mas información:

https://www.biotek.com/products/imaging-microscopy-cell-imaging-multi-mode-readers/cytation-1-cell-imaging-multi-mode-reader/

Valor añadido

Cytation 1  potencia al proyecto IMLINFO y a la comunidad científica del IDIBAPS porque permite el estudio de 3D de la eficacia de nuevas combinaciones de fármacos de modo automático en placas de 96 pocillos, reforzando el high-throughput screening, al permitir aumentar el número de réplicas experimentales y combinaciones  terapéuticas.

Este punto es de especial interés en el proyecto IMLINFO ya que la empresa farmacéutica Palo Biofarma, miembro del consorcio, provee a CRCT-INSERM e IDIBAPS  librerías de inhibidores para receptores de adenosina como A2aR, A2bR, así como enzimas que participan en su generación, como CD73, o en la traducción de señales como la fosfodiesterasa 10 (PDE10).

Estos fármacos se combinan con anticuerpos anti-PD1 para evaluar su actividad antitumoral en modelos 3D de LNH. Cytation 1 agiliza la obtención de información cualitativa y cuantitativa sobre la eficacia de estas nuevas combinaciones terapéuticas para la selección de los mejores leads (candidatos) para el desarrollo farmacéutico.

Estudio de caso: Reconstruyendo linfomas de células de pacientes con linfoma del manto (LCM) y leucemia linfática crónica (LLC)

Durante los últimos meses los grupos del CRCT-INSERM (liderado por la Dra. Christine Bezombes) y del IDIBAPS (liderado por la Dra. Patricia Pérez-Galán), han dedicado su esfuerzo a la puesta punto de las condiciones de cultivo óptimas para mantener la viabilidad e inducir la proliferación de las células tumorales, así como la activación de las células T acompañantes del tumor.

Gracias al Cytation 1, se ha podido ver como los monocitos-macrófagos (en rojo) se integran y distribuyen en la estructura 3D de células primarias del LCM (en verde), permitiendo su proliferación y aumentando su viabilidad (ver video adjunto).

Del mismo modo, la estimulación de células primarias de LLC con un cocktail optimizado de citoquinas,  ha permitido obtener esferoides compactos (Figura A), e inducir la proliferación de las células B tumorales y de las células T acompañantes del tumor. La Figura B muestra marcajes con CFSE sin proliferar (área gris), con el cocktail de citoquinas que induce la división celular (pico amarillo) y el control sin citoquinas (pico azul).

Artículo de referencia: https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/23933705

Contacto:

IDIBAPS

C./ Rosselló, 149,

08036 – Barcelona

info@imlinfo.eu

http://www.imlinfo.eu/

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